摘要：【目的】几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA,EC 3.5.1.41)是昆虫几丁质代谢中的一种关键酶,在昆虫生长、发育和代谢中具有重要作用。本研究旨在克隆甜菜夜蛾secda5基因,对其进行原核表达,同时制备其蛋白的多克隆抗体。【方法】以pMD19-T-secda5重组质粒为模板,通过PCR技术获得编码甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)中肠几丁质脱乙酰酶secda5全长基因,连接pET-28a载体并转化E.coli BL21(DE3)构建工程菌。以不同IPTG浓度、培养温度对目的蛋白进行诱导表达。【结果】IPTG终浓度为0.50mmol/L、37℃诱导培养4h时蛋白表达量最高。诱导表达获得的重组蛋白经纯化后制备多克隆抗体。【结论】此研究成功克隆了甜菜夜蛾secda5基因,并进行了原核表达以及多克隆抗体的制备。
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 农业科技> 农业综合
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关键词：甜菜夜蛾 secda5 基因克隆 原核表达 抗体制备
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