摘要:目前L-苹果酸已经工业化生产,但仍存在苹果酸产生菌株来源有限和产量不高等问题,为了拓展苹果酸产生菌的种类及酶活性.通过基因工程手段分别利用pETDuet-1为载体在宿主细胞Escherichia coli BL21(DE3)中重组表达了谷氨酸棒状杆菌(Corynebacteriumglutamicum)和大肠杆菌(E.coli)来源的富马酸酶,并对两者的酶学性质以及催化效率进行了比较。结果表明:两种来源的富马酸酶均构建成功,谷氨酸棒状杆菌来源的富马酸酶(fumCc)最适温度和pH分别为30℃和8.0,大肠杆菌来源的富马酸酶(fumCe)最适温度和pH分别为40℃和7.0;酶动力学分析表明,fumCc酶催化效率(Kcat/Km)是fumCe的3.8倍。0.1g菌体细胞在10mL转化体系中催化1.5g富马酸钠,在各自的最适条件下反应6h,L-苹果酸的产率分别为85%和34%。
分类:期刊> 自然科学与工程技术> 工程科技I> 轻工业手工业
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关键词:富马酸酶 重组表达 谷氨酸棒状杆菌 大肠杆菌
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