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HnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体感染Hela细胞的稳定株筛选

摘要:目的:筛选不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体感染宫颈癌细胞株Hela细胞的稳定细胞株。方法:利用hnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体转染Hela细胞,采用嘌呤霉素抗性方法筛选稳定转染的Hela细胞系;将Hela细胞分为空白组(Hela)、阴性组(NC-shRNA)、干扰组1(shRNA1)、干扰组2(shRNA2)、干扰组3(shRNA3)和干扰组4(shRNA4),实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组细胞hnRNPA2/B1mRNA表达水平,Westernblot检测hnRNPA2/B1蛋白表达水平,筛选干扰沉默效率最高的细胞作为稳定沉默hnRNPA2/B1基因的稳转株。结果:经筛选获得稳定转染的宫颈癌Hela细胞株,干扰组2,干扰组3和干扰组4与空白组比较,hnRNPA2/B1基因和蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P〈0.05),其中干扰组4沉默效率最高。结论:成功构建hnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体感染的Hela稳定细胞株。

分类:期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 医药卫生综合

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关键词:rna干扰 短发夹rna 宫颈癌 hela细胞 慢病毒 不均一核糖核蛋白基因 

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