摘要:对来源于紫色色杆菌的ω-转氨酶基因(Genebank:JC032687.1)进行了生物信息学分析,其理论分子量为51213.42,是一种含有多个磷酸功能位点的亲水性蛋白质;利用pET-28a(+)为载体在宿主细胞E.coli.Rosetta(DE3)中重组表达了融合有Car9标签(Car9-tag)的ω-转氨酶;考察了诱导条件等对ω-转氨酶表达量的影响,摇瓶培养2 h后加入终浓度为1.0 mM的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导10 h后可获得高表达量的融合ω-转氨酶,其比酶活可达1 547.16 U·g^-1;采用了二氧化硅亲和吸附Car9-tagω-转氨酶对ω-转氨酶进行了分离纯化。
分类:期刊> 自然科学与工程技术> 工程科技I> 化学
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关键词:基因重组 高效表达
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