摘要：目的：在昆虫细胞中表达2型单纯疱疹病毒（HSV-2）糖蛋白D（gD2）胞外区基因，检测其免疫原性。方法：以HSV-2病毒基因组为模板，PCR扩增得到gD2片段，构建至杆状病毒质粒Baemind中，转染sf9细胞，包装重组杆状病毒，收集后连续感染sf9细胞，收获第4代重组杆状病毒（P4），通过Western blotting法鉴定蛋白表达情况，采用空斑实验检测重组病毒滴度，将P4代重组病毒作为种子大量感染sf9细胞，上清经镍柱亲和层析进行纯化，将纯化后的蛋白在第0、2和4周免疫BALB／e小鼠（gD2组），以PBS作为阴性对照（PBS组），ELISA检测小鼠血清中gD2特异性IgG滴度。结果；PCR鉴定和DNA测序，重组表达质粒gD2-Baemind构建正确，空斑实验检测重组病毒滴度为2．0×10^9pfu·mL^-1，纯化的gD2重组蛋白在相对分子质量37000处出现目标条带，纯度达90％以上。第6周gD2组小鼠免疫血清中gD2特异性IgG抗体滴度Logl0平均值达到4．34，与PBS组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：利用昆虫一杆状病毒表达系统表达的gD2胞外区蛋白具有良好的免疫原性，可作为HSu2疫苗的候选。
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关键词：生殖器疱疹 疱疹病毒2型 人 糖蛋白d
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