摘要：目的：探讨应用酵母双杂交系统筛选出与人巨细胞病毒（HCMV）ULl32编码蛋白相互作用的人胎脑cDNA文库组织蛋白，阐明其在先天性巨细胞病毒感染中可能的致病机制。方法：采用聚合酶链式反应扩增HCMVULl32片段，酶切、纯化扩增的目的片段及酵母诱饵表达载体pGBKT7，连接HCMVULl32片段到载体pGBKT7上，将连接后的重组体pGBKT7-ULl32转化到酵母菌AHl09中，再将人胎脑文库DNA也转化到酵母AHl09中，筛选与HCMVULl32编码蛋白相互作用的人胎脑文库蛋白，并对阳性克隆进行测序和生物信息学分析。结果：成功构建诱饵表达载体pGBKT7-ULl32，双酶切鉴定可见800及7500bp2条目的条带；转化文库质粒后计算转化效率为6．6×10^3cfu·μg^-1，显色反应显示有95个菌落呈蓝色，最终确认10个克隆与HCMVULl32编码蛋白相互作用，Blast结果显示7个克隆与CAML高度同源。结论：利用酵母双杂交系统成功筛选出与HCMVULl32编码蛋白相互作用的人胎脑cDNA文库蛋白CAML，推测该目的蛋白可能在HCMV感染所致神经系统损伤、病毒的入侵和增殖过程中发挥重要作用。
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关键词：人巨细胞病毒 ull32蛋白 酵母双杂交系统 人胎脑cdna文库
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