摘要：目的：探讨骨髓源内皮祖细胞分泌的外泌体（EPCs-Exos）对血管新生和胶原沉积的作用，阐明其促进皮肤伤口愈合的可能机制。方法：分离、培养并鉴定内皮祖细胞（EPCs），同时分离并鉴定EPCs-Exos。观察分析EPCs摄取EPCs-Exos。16只大鼠随机分为4组，建立皮肤缺损模型，分别将等量的PBS，50、100和150mg·L^-1EPCs-Exos分别注射至4组大鼠的皮肤缺损周围区域。在0、3、7和14d测量各组大鼠伤口闭合区域的范围；14d时取愈合区组织进行Masson三色染色及CD31免疫荧光染色，评估EPCs-Exos的治疗效果。在体外，将含有PBS，50、100和150mg·L^-1EPCs-Exos培养基和人脐静脉内皮细胞（HuVECs）共培养，利用划痕实验和成管实验检测HUVECs的迁移和毛细血管网的形成。应用Westerll blotting法检测HUVECs中促血管生成相关基因血管内皮生长因子A（VEGFA）表达水平。结果：成功分离并鉴定原代EPCs，EPCs的CD31免疫荧光染色、DiL-ac-LDL和FITC-UEA-I双染均呈阳性。电镜观察EPCs-Exos形态为近圆形，直径为40～100nm。在注射EPCs-Exos的大鼠皮肤损伤模型中，随着注射剂量增大，皮肤缺损疤痕直径逐渐缩小，疤痕愈合度逐渐增加，组间比较差异有统计学意义（P〈O．05）。EPCs-Exos呈剂量依赖性促进愈合皮肤组织胶原的成熟，14d时150mg·L^-1EPCs-Exos注射组最明显。在体外实验中，EPCs-Exos呈剂量依赖性刺激内皮祖细胞促进其迁移和毛细血管网的形成及上调VEGFA表达水平，150mg·LEPCs-Exos组的迁移速率、网分支数目和VEGFA表达水平均高于50mg·L^-1EPCs-Exos组和PBS组（P〈O．05）。结论：EPCs-Exos可以通过正向调控血管内皮细胞的功能而促进大鼠创伤性皮肤缺损的修复。
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关键词：内皮祖细胞 外泌体 皮肤缺损 血管内皮生长因子a
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