摘要:目的 对田鼠巴贝西虫(Babesia microti)的诊断抗原分泌抗原1(Babesia microtisecreted antigen 1,BmSA1)的截短部分(tBmSA1)进行克隆构建、原核表达与纯化,并对重组tBmSA1进行质谱鉴定以及抗原性鉴定。方法 通过PCR扩增截短型tBmSA1基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组tBmSA1,使用AKTA进行镍亲和层析纯化,并对纯化的重组tBmSA1进行质谱分析,通过Western Blot和ELISA鉴定重组tBmSA1的抗原性。结果 成功构建了重组质粒pET-30a(+)-tBmSA1,重组tBmSA1得到高效表达和纯化,质谱分析验证了其正确性,Western Blot和ELISA结果显示其具有较好的抗原性。结论 实现了田鼠巴贝西虫tBmSA1的原核高效表达,并验证了其诊断价值,为田鼠巴贝西虫感染诊断奠定了基础。
分类:期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 医学教育与医学边缘学科
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关键词:田鼠巴贝西虫 分泌抗原 纯化 质谱分析 抗原性鉴定
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