摘要：目的 建立1种基于荧光定量PCR扩增原理的联合高分辨率熔解曲线技术（qPCR-HRM）,用于耐利福平结核杆菌（RR-TB）的快速检测。方法 选取GenBank中结核杆菌rpoB基因序列（利福平耐药决定域）,分别设计2对特异性引物rpoB-1R/F、rpoB-2R/F扩增rpoB基因的不同片段,构建荧光定量PCR反应体系,加入HRM饱和荧光染料监测扩增产物进行HRM分析。以H_（37）R_a菌株为阴性对照,检测240株临床诊断肺结核培养菌株对利福平（RFP）的耐药性;以传统的药敏实验结果为金标准,对qPCR-HRM法检测RR-TB的灵敏度、特异度、重复性进行评估。结果 qPCR-HRM法检测RR-TB灵敏度为84.8%,特异度为96.5%,批内、批间变异系数均〈1%,检测时间为2h以内。结论 qPCR-HRM法检测RR-TB耗时较短、特异度强、灵敏度高、快速易操作,适合在有条件的基层医疗机构进行推广。
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 医学教育与医学边缘学科
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关键词：耐利福平 结核杆菌
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