摘要:目的 探讨miR-590在胆管癌细胞上皮间充质转化(EMT)中的作用及可能机制。方法 采用荧光定量PCR(QPCR)检测人正常肝内胆管上皮细胞系HIBEC以及人胆管癌细胞系HUCCT1、HCCC-9810、RBE中miR-590的表达情况。双荧光素酶报告试验评价miR-590对SIP1的靶向调控作用。向HUCCT1细胞转染miR-590 mimics(转染组)和无义核苷酸序列(NC组),Western blotting 检测两组EMT相关蛋白的表达。向HUCCT1细胞转染SIP1 siRNA,Western blotting 检测干扰SIP1后EMT相关蛋白的表达。结果 HUCCT1、HCCC-9810、RBE细胞系中miR-590水平分别为0.37±0.084、0.31±0.071和0.53±0.089,显著低于人正常肝内胆管上皮细胞系HIBEC的1.12±0.201,差异具有统计学意义( P <0.05)。miR-590可抑制野生型SIP1 3’UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型SIP1 3’UTR-MUT的荧光素酶活性无影响。转染miR-590 mimics可以下调HUCCT1细胞中Vimentin、N-cadherin、ZEB1、ETS1、SNAIL1及TWIST1蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达。SIP1沉默能上调上皮标志物E-cadherin蛋白表达,并下调间充质蛋白Vimentin和N-cadherin蛋白表达。结论 miR-590通过靶向SIP13’-UTR阻断其翻译,最终抑制胆管癌细胞上皮间充质转化。
分类:期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 肿瘤学
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关键词:胆管癌 sip1 上皮间充质转化
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