摘要：目的探讨在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中,mi R-144-3p表达的生理功能和作用机制,并预测其靶基因,为成骨细胞分化的深入研究提供实验依据。方法采用大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）,并在体外诱导间充质干细的成骨分化,通过q RT-PCR检测成骨分化标志基因（Runx2,OCN）以及mi R-144-3p的表达;通过向BMSCs株转染mi R-144-3p mimic以及mi R-144-3p inhibitor,检测mi R-144-3p表达对BMSCs分化的影响,并通过Western blot以及q RT-PCR检测mi R-144-3p靶蛋白在RNA水平以及蛋白水平的表达变化。结果在体外诱导BMSCs成骨分化过程中,成骨分化标志基因（Runx2,OCN）的表达量逐渐升髙,而mi R-144-3p的表达量则逐渐降低,到诱导成骨第21天表达水平最低;检测各组ALP活性发现,相比于对照组mi R-144-3p mimics转染组ALP活性显著降低（P〈0.05）,mi R-144-3p inhibitor转染组ALP活性显著升高（P〈0.05）;运用多种靶基因预测数据库Target Scan、micro RNA.org和mi Randa对mi R-144-3p进行靶基因的预测分析发现,smad4最可能是mi R-144-3p的靶基因;q RT-PCR结果表明,smad4在各组中的表达水平差异无统计学意义（P〉0.05）;Western blot结果显示,smad4在mi R-144-3p mimics转染组表达显著下降,在mi R-144-3p inhibitor转染组则显著升高,相比于对照组差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 mi R-144-3p参与调控大鼠BMSCs成骨分化,其抑制成骨分化的功能是通过降低smad4转录后的表达水平来实现。
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关键词：骨髓间充质干细胞 成骨分化
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