摘要：目的：建立在外周伤害性感受器特异性表达GCaMP6f蛋白的方法，并在疼痛刺激条件下，应用钙成像技术实时监测小鼠伤害性感受神经元的细胞内钙活动。方法：包装并纯化rAAV2／9-CAG—DIO—GCamp6f病毒，并通过立体定位注射该病毒于SNS—Cre小鼠L4／L5背根神经节（dorsal root ganglion，DRG）内。动物存活3—4周，然后制备L4／L5整节DRG标本，检测GCaMP6f蛋白表达情况，并观察疼痛刺激条件下诱致的伤害性DRG神经元的钙反应情况。结果：SNS—Cre小鼠L4／L5DRG内注射rAAV2／9-CAG—DIO—GCamp6f病毒后，荧光显微镜观察显示GCamp6f病毒特异性地表达在中、小型的DRG神经元。给予DRG神经元高钾刺激（KC130mmol／L）可以诱致神经元胞内的钙离子水平显著上升。进一步给予伤害性DRG神经元特异性标志物TRPV1受体的激动剂Capsaicin（1μmol／L），结果显示其可以诱致GCamp6f蛋白标记的DRG神经元呈现显著的钙反应。结论：本研究建立的SNS—Cre小鼠DRG在体注射rAAV2／9-CAG—DIO—GCamp6f病毒特异性标记伤害性DRG神经元的方法是成功的，该方法的成功建立对于活体特异性监测伤害性DRG神经元的功能活动提供了重要工具。
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 基础医学
收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版) > 统计源期刊(中国科技论文优秀期刊) > 知网收录(中) > 维普收录(中) > 万方收录(中) > CA 化学文摘(美) > JST 日本科学技术振兴机构数据库(日) > 哥白尼索引(波兰) > 国家图书馆馆藏 > 上海图书馆馆藏
关键词：钙成像 伤害性感受器 drg gcamp6f 小鼠
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
