摘要:为获得耐高温的重组乳糖酶,PCR扩增激烈热球菌(Pyrococcus furious)乳糖酶基因、构建毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA/Lac并转化毕赤酵母X-33菌株。重组酵母转化子经甲醇诱导,重组嗜热乳糖酶实现了分泌表达并经蛋白印迹验证。纯化前上清液中乳糖酶总活力高达125U/mL,经镍亲合纯化得重组酶,SDS-PAGE显示其纯度在95%以上,比活力1800U/mg,该酶最适温度在105℃左右且热稳定性好,具有很强的水解乳糖能力。
分类:期刊> 自然科学与工程技术> 工程科技I> 轻工业手工业
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关键词:嗜热乳糖酶 激烈热球菌 毕赤酵母 分泌表达 纯化
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