摘要：以Ni2+螯合的琼脂糖凝胶(GLK-GelNi)作为固定化载体,对融合肝素酶Sumo-HepI-His的固定化进行了研究,实现了融合酶的一步纯化和固定化。通过对固定化条件的优化,得到较优的固定化体系:载体与粗酶质量比为30∶1,固定化pH为7.0,吸附时间为6h,该条件下获得的固定化酶酶活10.07±0.35IU/mL载体。酶学性质研究结果表明:固定化酶在30℃的热稳定性相对于游离酶显著提高,固定化酶半衰期是游离酶的8倍,最适反应温度提高了3℃,反应pH的耐受性也有了明显的提高。此外,与游离酶相比,固定化酶的储藏稳定性和可重复利用性良好,在4℃下放置60d能保持76%的初始活性;固定化酶重复使用8次后,酶活仍剩余75.8%;而且GLK-GelNi载体本身具有良好的重复利用性,重复固定5次Sumo-HepI-His后,载体对酶的活性吸附仍能达到88.9%。整体而言,固定化Sumo-HepI-His显现了较好的工业应用潜能。
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关键词：肝素酶i 固定化 酶活
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