摘要：目的：构建人前动力蛋白受体2（hPROKR2）274位缬氨酸残基突变的真核表达质粒pKR5-mGlu-FlaghPROKR2（V274D或V274R或V274T或V274A）,并观察其蛋白表达。方法：将pKR5-mGlu-Flag-mPKR2质粒和PCR扩增的hPROKR2编码序列用MluⅠ、XbaⅠ酶切后连接,构建pKR5-mGlu-Flag-hPROKR2质粒;以后者为模板,利用定点突变技术分别构建pKR5-mGlu-Flag-hPROKR2（V274D）、（V274R）、（V274T）、（V274A）真核表达质粒;用Western印迹验证Flag-hPROKR2（V274D）、（V274A）、（V274T）、（V274R）在真核细胞中的表达。结果：构建了pKR5-mGlu-Flag-hPROKR2（V274D）、（V274R）、（V274T）、（V274A）真核表达质粒,并观察到相应的蛋白表达。结论：pKR5-mGlu-Flag-hPROKR2（V274D）、（V274R）、（V274T）、（V274A）真核表达质粒的构建,为后期检测第274位缬氨酸对hPROKR2蛋白分子空间结构及功能的影响创造了条件。
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 基础科学> 生物学
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关键词：人前动力蛋白受体2 定点突变 缬氨酸
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