摘要：目的 建立一种定量检测肝细胞癌（HCC）组织肝细胞核因子4α（HNF4α）mRNA的方法.方法 取手术获得的HCC组织16例,提取总RNA,逆转录PCR扩增获得全长HNF4αmRNA对应cDNA产物,经TA克隆后,测序确认.根据获得序列,设计检测HNF4αmRNA引物及MGB荧光探针.以体外转录HNF4αmRNA为标准品,建立一步法逆转录荧光定量PCR检测方法,同时设定β-actin mRNA为内参对照,最终计算得到组织HNF4αmRNA水平.采用免疫组化染色检测HNF4α蛋白表达,比较HNF4αmRNA水平与HNF4α蛋白表达的对应结果.结果 HCC组织HNF4αmRNA定量标准曲线斜率为-3.237,相关系数r值达0.994,β-actin mRNA定量标准曲线斜率为-3.037,相关系数r值为0.996,表明建立的方法可用于检测HNF4αmRNA定量（V-4α值）,16例HCC组织HNF4αmRNA与HNF4α 蛋白表达结果呈一致性对应关系.结论 我们初步成功建立了定量检测HCC组织HNF4αmRNA水平方法,其意义还需要进一步研究.
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 消化系统疾病
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关键词：肝细胞癌 逆转录荧光定量pcr法
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