摘要：目的 探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cell,BM SC）中的表达及其对成脂分化的影响。方法 体外贴壁法原代培养的大鼠BM SC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软骨细胞和成骨细胞一起采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中rno-miR-195-5p的表达情况;采用荧光素酶报告基因实验验证骨形态发生蛋白受体-1α（Bmpr1α）是否为rno-miR-195-5p的靶基因,采用Western印迹法和油红O染色检测rno-miR-195-5p对Bmpr1α表达和BMSC成脂分化的影响。结果流式细胞术与免疫荧光分析显示所培养细胞具备BMSC特征。rno-miR-195-5p在补肾方含药血清干预的原代BM SC中表达明显升高（P〈0.01）,且在分化完成的软骨细胞和成骨细胞中高表达。双荧光素酶报告实验与Western印迹法证实Bmpr1α是rno-miR-195-5p的靶基因。转染rno-miR-195-5p mimics上调BM SC中rno-miR-195-5p可抑制Bmpr1α的表达（P〈0.05）,降低成脂分化能力;而转染rno-miR-195-5p inhibitor可显著增加BM SC中Bmpr1α的表达（P〈0.01）,增强成脂分化能力。结论 补肾方含药血清干预BMSC上调rno-miR-195-5p,通过降低其靶基因Bmpr1α的表达而降低BMSC的成脂分化,改善骨质疏松症状。
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 工程科技II> 综合科技B类综合
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关键词：骨髓间充质干细胞 骨质疏松
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