摘要：多重耐药菌株的出现给临床治疗带来了困难，噬菌体编码的裂解酶能够杀死病原菌，是潜在的重要杀菌因子．本实验采用PCR技术，扩增类志贺邻单胞菌（Plesiomonas shigelloides）噬菌体ΦP4—7裂解酶gp2基因并克隆至质粒pQE30上进行表达，重组蛋白采用Ni-NTA亲和层析法进行纯化．重组裂解酶Gp2最适反应pH为9；裂解酶40℃保温15min，酶活剩余56．4％．底物专一性实验结果显示，该裂解酶能够高效裂解5种革兰氏阴性菌，即铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、大肠杆菌（Escherichiacoli）、粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）、摩氏摩根菌（Morganella morganii）、弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii），以及3种革兰氏阳性菌，即金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）、地衣芽胞杆菌（Bacillus licheniformis）．杀菌实验结果表明，裂解酶Gp2可与EDTA、LAB-35以及SDS配合使用，进一步提高该酶对铜绿假单胞菌和枯草芽胞杆菌的杀菌活性．裂解酶Gp2具有高效广谱裂菌活性，具有潜在的应用价值．
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 工程科技I> 综合科技A类综合
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关键词：噬菌体裂解酶 蛋白表达 杀菌活性
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