摘要：肠道病毒3D蛋白是其RNA聚合酶。柯萨奇病毒B3型（coxsackievirus B3,CVB3）主要感染心脏,其3D蛋白在心肌表达中的时序和分布尚不清楚。本研究将通过聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）获得的CVB 3D片段插入pET28a（＋）的表达框,获得pET28a（＋）-3D重组质粒。异丙基β-D-硫代半乳糖苷（isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导pET28a（＋）-3D表达3D-His蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）后,切胶,获得3D-His蛋白。3D-His蛋白加佐剂免疫新西兰大白兔制备3D蛋白多克隆抗体,蛋白免疫印迹法检测抗体效价及特异性。结果显示,本研究获得了高效价且特异性好的抗CVB3 3D蛋白抗体,可用于CVB3 3D蛋白功能的后续研究。
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关键词：柯萨奇病毒b3型 3d聚合酶 抗体 原核表达
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