摘要：本研究旨在探究外源添加血管内皮生长因子（VEGF）对绵羊卵母细胞体外成熟过程中FLT-1表达的影响。采用3种不同的体外成熟培养方式：裸卵单独培养、颗粒细胞与裸卵共培养以及卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocytes complexes，COCs)培养，外源添加5 ng·mL-1血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)为试验组，不添加为对照组，采用qPCR、Western blot分别检测绵羊卵母细胞及颗粒细胞中FLT-1 mRNA和蛋白表达水平。结果表明：1)3种不同培养方式下，无论是否添加VEGF，颗粒细胞与卵母细胞中均能检测到FLT-1 mRNA和蛋白表达。添加VEGF能极显著降低共培养试验组12、16和20 h以及COCs试验组4、8、12、16和24 h颗粒细胞FLT-1 mRNA表达(P＜0.01)，能极显著降低共培养试验组12、20和24 h以及COCs试验组4、8和12 h卵母细胞FLT-1 mRNA表达(P＜0.01)，但会极显著增加裸卵试验组4～24 h卵母细胞FLT-1 mRNA表达(P＜0.01)。2)添加VEGF能够极显著降低共培养试验组和COCs试验组中颗粒细胞FLT-1蛋白4～12 h的表达量(P＜0.01)，共培养试验组和COCs试验组中颗粒细胞FLT-1蛋白表达呈波动性下降趋势。COCs对照组和试验组颗粒细胞中FLT-1蛋白表达量在各时间点均高于同期共培养试验组。3)3种不同培养方式中，除裸卵试验组在20～24 h有一个急剧升高外，其余组中卵母细胞FLT-1蛋白表达量总体均呈波动性下降趋势。综上表明，卵母细胞和颗粒细胞中存在FLT-1的自分泌和旁分泌，卵母细胞中FLT-1 mRNA的表达与外围颗粒细胞的存在与否、数量多少以及包裹方式息息相关；在体外培养环境下，添加VEGF有效地激活了FLT-1 mRNA表达，但同时结合FLT-1蛋白以促进卵母细胞成熟的生物学效应，从而减少了FLT-1蛋白的表达。
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 农业科技> 畜牧与动物医学
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关键词：绵羊 卵母细胞 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体1
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