摘要：目的 优化日本血吸虫感染小鼠肝脏肉芽肿细胞的分离方法,以获得足量和纯净的肉芽肿活细胞,流式检测确定细胞的分离效果。方法 血吸虫尾蚴经皮感染C57BL/6小鼠,于感染后6周、12周剖杀小鼠,取肝脏,采用Ⅳ型胶原酶两步消化法分离肉芽肿细胞,并对胶原酶浓度及消化时间进行探索;进行流式检测,分析粒细胞、淋巴细胞和CD4+T的分离效果。结果 感染6周小鼠肝脏的Ⅳ型胶原酶最佳浓度为0.25mg/mL,最佳消化时间为30min(第一步)和30min(第二步),流式细胞仪检测该条件可获得较高比例CD4+T细胞;而感染12周小鼠的肝脏,Ⅳ型胶原酶最佳浓度为0.3mg/mL,消化时间分别为40、30min,流式检测此条件可获得更高比例的CD4+T细胞。结论 急慢性肝脏肉芽肿细胞的分离所需Ⅳ型胶原酶的浓度不同;采用本研究优化的胶原酶两步消化法可获得大量、纯净的肉芽肿活细胞,并且细胞表面标志保存完好,为研究日本血吸虫肝脏肉芽肿的细胞机制提供重要材料。
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 感染性疾病及传染病
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关键词：日本血吸虫 肝脏虫卵肉芽肿 肉芽肿细胞 分离 流式细胞术
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