摘要：目的探讨二次贴壁法获得的人脐带间充质干细胞（human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,hUCMSCs）的体外安全性及其对1型糖尿病（type 1 diabetes,T1D）大鼠血糖的调节作用,为临床T1D的治疗提供实验依据。方法采用二次贴壁法从人脐带中进行多能干细胞的大规模培养,建立主细胞库（master cell bank,MCB）和工作细胞库（working cell bank,WCB）,对干细胞的免疫表型、体外致瘤性、核型、端粒酶进行检测,以确定其体外安全性;通过干细胞体内移植试验初步分析其对T1D大鼠葡萄糖转化能力的影响。结果以1根20 cm脐带作为材料,经二次贴壁分离扩增后,建立MCB共250管（P3代）、WCB共250管（P5代）,每管均4×10~6个hUCMSCs。MCB和WCB细胞均高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD34、CD45、CD14、CD79a和HLA-DR;染色体稳定、无体外致瘤性。将WCB细胞取出复苏扩增1代后移植T1D大鼠,6周内,大鼠血糖水平较对照组（注射等量生理盐水）显著下降（P〈0.05）,且体重下降缓慢（P〈0.05）;6周后,与对照组相比,移植组大鼠胰岛组织形态明显恢复,肝脏合成葡萄糖转运蛋白能力提高。结论采用二次贴壁法获得的hUCMSCs所建立的MCB和WCB细胞生物特性一致,且具有良好的安全性。初步移植结果预示,T1D大鼠GLUT蛋白表达提高可能与hUCMSCs改善肝脏糖原合成能力有关。
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关键词：人脐带间充质干细胞 二次贴壁 安全性 1型糖尿病 葡萄糖转运蛋白
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