摘要：目的：探讨正常人外周血造血干细胞（PB-HSC）分泌的微泡（microvesicle,MV）的免疫调节功能及对造血集落形成的影响。方法：采用密度梯度离心法分离PB-HSC并培养,收集第48 h上清液,使用超速离心法分离提取MV。通过电子显微镜观察MV形态;采用BCA法定量检测MV蛋白分泌量;采用流式细胞术检测其表面标志物。将MV与正常人外周血单个核细胞（PB-MNC）共培养,共培养12 h后通过共聚焦扫描电子显微镜观察MV与PBMNC的作用方式;共培养48 h后采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）法检测上清中IL-2,IL-6,IL-8,IL-10,IFN-γ及TNF-α的分泌量;采用流式细胞仪检测T细胞亚群、T细胞激活变化及不同亚群细胞胞内细胞因子染色情况。用甲基纤维素半固体培养基检测MV及MV与PB-MNC共培养48 h后上清液对外周血造血干细胞集落形成的影响。结果：电子显微镜观察分离得到的MV为卵圆形膜性小囊泡,BCA法检测MV蛋白分泌量为29-110μg。流式细胞术测得MV带有混合标志,其中高表达特异性标志CD63（85.86%）与干细胞标志CD34（33.52%）。共培养12 h后共聚焦扫描电子显微镜显示,MV与PB-MNC二者相融合。共培养48 h后,ELISA法检测结果表明,MV可促进PB-MNC分泌IL-6,IL-8,IL-10与TNF-α,而IL-2和IFN-γ水平均无变化明显。流式细胞术结果显示,T细胞亚群及T细胞的激活无明显改变。胞内因子染色结果表明,CD11c＋细胞内IL-8因子显著增多。集落培养实验表明,MV及MV与PB-MNC共培养48 h后上清液可促进造血集落形成。结论：PB-HSC来源的MV具有免疫调节及促进造血集落形成的作用。
分类：期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 心血管系统疾病
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关键词：外周血造血干细胞 微泡 免疫调节 造血
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