摘要:目的 观察树鼩海马微环境中谷氨酸(Glu)及钙(Ca^2+)改变对细胞色素C(CytC)释放以及caspase凋亡基因激活的影响,探讨银杏内酯B(GB)干预海马神经元线粒体应激的分子机制。方法 使用单泵等速微灌流系统行树鼩海马Glu及Ca^2+微灌流,24h后用免疫组化法观察海马神经元CytC蛋白表达;免疫印迹法检测线粒体及胞质的CytC含量;实时荧光定量PCR技术检测海马caspase-3及caspase-9 mRNA的含量。微灌流Glu和Ca^2+溶液后6h于舌下静脉注射银杏内酯B5mg/kg,24h后观察上述指标的改变。结果 树鼩海马微灌流Glu和Ca^2+溶液后24h,线粒体CytC含量显著下降,而胞质部分出现CytC;海马组织caspase-3、caspase-9 mRNA明显升高。GB治疗组线粒体CytC含量增多,胞质中仍有CytC存在,而海马组织caspase-9 mRNA显著降低,但caspase-3 mRNA无差异。结论 海马微环境中Glu与Ca^2+的大量堆积促进线粒体CytC的释放,可能是激活caspase级联反应而导致线粒体应激、神经元继发损伤的始动环节;GB的神经保护效应可能与其特异性拮抗血小板活化因子(PAF)受体,抑制Ca^2+内流,部分阻滞CytC释放入胞质,从而减少caspase-9基因转录有关。
分类:期刊> 自然科学与工程技术> 医药卫生科技> 基础医学
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关键词:海马 线粒体 细胞色素c 银杏内酯
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