摘要：目的 观察游离二氧化硅（SiO2）直接或间接作用于大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞株RLE-6TN而诱导发生上皮间质转化（EMT）的情况,及其对RLE-6TN表面标志蛋白表达影响情况.方法 ①采用支气管肺泡灌洗术提取无特定病原体级SD大鼠肺泡巨噬细胞（AM）.以质量浓度为0~140 mg/L的SiO2混悬液处理AM和RLE-6TN并培养24、48和72 h后,采用CCK-8实验检测细胞存活率,筛选后续实验染尘剂量.②取AM接种于Transwell的小室层与RLE-6TN共培养.设直接对照组（单独RLE-6TN,不作染尘处理）、直接染尘组（单独RLE-6TN,予质量浓度为100 mg/L的SiO2混悬液处理）、间接对照组（AM与RLE-6TN共培养,不作染尘处理）和间接染尘组（AM与RLE-6TN共培养,予质量浓度为100 mg/L的SiO2混悬液处理AM）,分别于染尘0、24、48和72 h后收获细胞,用免疫印迹法测定RLE-6TN中的E-黏钙蛋白（E-cad）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的相对表达水平.结果 ①根据CCK-8结果,后续实验的SiO2染尘剂量设为100 mg/L.②RLE-6TN中E-cad和α-SMA相对表达水平在染尘处理和染尘时间的交互效应上均有统计学意义（P〈0.01）.其中,直接染尘组和间接染尘组RLE-6TN在48和72 h的E-cad相对表达水平均低于同时间点直接对照组（P〈0.05）,直接染尘组RLE-6TN在72 h时间点的E-cad相对表达水平分别低于同组0和24 h时间点（P〈0.05）,间接染尘组RLE-6TN在48和72 h时间点的E-cad相对表达水平均低于同组0 h时间点（P〈0.05）;在48和72 h时间点,直接染尘组和间接染尘组α-SMA相对表达水平分别高于同时间点的相应对照组（P〈0.05）,且间接染尘组RLE-6TN中α-SMA相对表达水平均高于直接染尘组（P〈0.05）;2个染尘组RLE-6TN中α-SMA相对表达水平均呈随着染尘时间的增加而增加的时间-效应关系（P〈0.05）.结论 游离SiO2直接或间接染尘均可诱导RLE-6TN发生EMT,导致E-cad表达下调,α-SMA表达呈现时间-效应性�
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关键词：游离二氧化硅 肺泡上皮细胞 肺泡巨噬细胞 上皮间质转分化
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