摘要:目的 探讨覆盖不同处理方法富血小板血浆(PRP)的3D打印聚己内酯(PCL)支架对牙髓细胞黏附、增殖及分化的影响。方法 用冻干法和凝胶法制备PRP并覆盖在3D打印的聚己内酯支架上,免疫荧光染色观察各组支架牙髓细胞的早期黏附情况,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移情况,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定ALP活性,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞成骨相关基因的表达。采用单因素方差分析进行统计分析,LSD-t检验进行两两比较。结果 免疫荧光结果显示黏附在冻干组的细胞最多(1999.33个/总视野),凝胶组次之(1043.33个/总视野),单纯支架组最少(843.00个/总视野),而且冻干组和凝胶组相比,差异有统计学意义(F=19.36,P〈0.01),冻干组和单纯支架组对比,差异有统计学意义(F=23.42,P〈0.01)。细胞增殖实验显示,3组支架的细胞都呈增长趋势,但是在各个测定时间点,任何2组之间的细胞增殖都没有显著差异。细胞迁移结果显示,冻干组(279.75个/视野)和凝胶组(167.00个/视野)的细胞数目显著高于单纯支架组(134.75个/视野),差异有统计意义(F_(冻单组)=7.45、F_(凝单组)=1.88,P〈0.01),而冻干组和凝胶组相比则差异无统计学意义。ALP活性结果显示,3个组别中冻干组活性最高(ALP_(7d)=12.57 U/gprot、ALP_(14d)=23.20 U/gprot、ALP_(21d)=58.98 U/gprot),在第7天凝胶组次之(6.65 U/gprot),单纯支架组最低(5.93 U/gprot),而在第14和21天,单纯支架组次之(ALP_(14d)=15.56 U/gprot、ALP_(21d)=53.74 U/gprot),凝胶组最低(ALP_(14d)=13.35 U/gprot、ALP_(21d)=47.83 U/gprot)。在第7、14和21天,冻干组的ALP活性显著高于凝胶组(F_(7d)=3.20,P_(7 d))〈0.01;F_(14 d)=5.34,P_(14 d)〈0.01;F_(21 d)=6.04,P_(21 d)〈0.01)和单纯支架组(F_(7 d)=3.6
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关键词:富血小板血浆 3d打印 组织支架 聚己内酯 牙髓细胞 生物学行为
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