摘要：目的 探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）对难治性免疫性血小板减少症（refractory immune thrombocytopenia,r ITP）患者B淋巴细胞分化及分泌功能的影响。方法 酶消化法提取健康胎儿hUC-MSCs;密度梯度离心法分离2012年6月至2013年10月浙江省中医院26例rITP患者和6名健康供者的外周血单个核细胞;美洲商陆（Pokeweed,PWM）刺激外周血B细胞分化;酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）检测rITP患者和健康供者外周血单个核细胞和hUC-MSCs共培养时IgG、IgM的分泌量;En Vision免疫组化法测B细胞诱导的成熟蛋白-1（B lymphocyte-induced maturation protein1,Blimp-1）表达。结果 （1）流式细胞技术测健康胎儿脐带提取的h UC-MSCs表面CD44表达为99.8%。（2）PWM浓度为30 mg/L,作用4 d时r ITP患者组IgG、IgM分泌量分别为（7.39±1.42）和（5.44±0.17）μg/L,明显高于健康供者组（P=0.014、0.039）。（3）h UC-MSCs和rITP患者外周血单个核细胞以2∶10共培养时IgG、IgM分泌量分别为（4.98±1.63）μg/L和（3.78±0.82）μg/L,明显低于无hUC-MSCs时IgG、IgM分泌量（P=0.005、0.003）,且和健康供者组差异无统计学意义（P=0.266、0.543）;此比例下rITP患者组Blimp-1蛋白表达率为33.51%,较无hUC-MSCs时明显下降（P=0.026）,与健康供者组比差异无统计学意义（P=0.076）。结论 hUC-MSCs和rITP患者外周血单个核细胞以2∶10比例共培养,可明显减少rITP患者IgM、IgG的分泌量,抑制Blimp-1蛋白的表达,提示hUC-MSCs对rITP患者B细胞分化为浆细胞分泌抗体有一定的抑制作用,为临床hUC-MSCs治疗rITP提供一定的实验依据。
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关键词：血小板减少 间质干细胞 b淋巴细胞
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