摘要：目的检测胃硬癌的条件培养基(CM)对成纤维细胞自噬和衰老的影响,探讨胃硬癌细胞对成纤维细胞的影响及机制。方法利用胃硬癌细胞株KATOⅢ和NUGC4的CM作用于人正常成纤维细胞系FEF3和WI38。共培养并观察其形态学改变,检测增殖情况。Western blotting检测凋亡、自噬、衰老相关蛋白的变化。SA-β-Gal染色研究成纤维细胞衰老情况。检测雷帕霉素和CM作用下对成纤维细胞衰老和自噬的影响。结果CM作用下成纤维细胞出现了细胞质空泡化、核固缩等特征性改变,同时自噬被抑制。随着作用时间增加,成纤维细胞数量减少,衰老相关蛋白p21表达上调。SA-β-Gal染色后残存的细胞表现衰老的特征。采用雷帕霉素处理成纤维细胞诱导自噬后,自噬被加强,而衰老被抑制。结论胃硬癌细胞通过抑制成纤维细胞的自噬,诱导成纤维细胞提前衰老。
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关键词：胃硬癌 成纤维细胞 自噬 衰老 条件培养基
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