摘要：目的研究大鼠肠缺血再灌注（U／R）损伤后肠黏膜差异表达蛋白质的变化，为探讨II／R损伤后肠黏膜损伤的分子机制提供理论依据。方法16只SD大鼠，完全随机法分为假手术组（S组）和II／R损伤组（II／R组），每组8只。S组只分离肠系膜上动脉（SMA）但不阻断，II／R组阻断SMA 1h后再开放1h。再灌注结束即刻刮取肠黏膜，利用高分辨双向凝胶电泳对肠黏膜组织进行蛋白质分离，Image Master 2D Elite5．0图像分析软件进行分析。应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱获取肽质量指纹图谱，检索NCBInr蛋白数据库鉴定表达差异的蛋白质，明确其生物学功能。结果S组和II／R组分别有（1287±20）和（1404±20）个蛋白质点得到分离，组内匹配点数分别有（1136±20）和（1197±20）个，匹配率分别为88．3％和85.3％；组间匹配点数为（1084±20）个，匹配率为84．2％。发现16个表达差异的蛋白质点，其中12个在II／R组中表达下调，4个表达上调。通过质谱分析鉴定13个蛋白质，检索NCBInr数据库查询到其主要是顺乌头酸酶、丙酮酸激酶和细胞色素C还原酶，蛋白二硫化物异构酶A3、醛脱氢酶和醛糖还原酶，前3种酶与改善能量代谢相关，后3种酶与抗氧化应激、抑制凋亡相关。结论建立了重复性较好的正常与II／R损伤后大鼠肠黏膜组织的双向凝胶电泳图谱。II／R的损伤机制可能与顺乌头酸酶、丙酮酸激酶、细胞色素C还原酶、蛋白二硫化物异构酶A3、醛脱氢酶和醛糖还原酶的下调有关。
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关键词：缺血再灌注损伤 蛋白质组学 肠黏膜 电泳 凝胶 双向 光谱分析 质量
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